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ELISA分析儀器

    ELISA試劑技術(shù)20世紀80年代引入中國，現(xiàn)已被廣泛應用。與之相關(guān)的分析儀器也得到了快速發(fā)展，我國先后出現(xiàn)了十余家酶標儀、洗板機生產(chǎn)廠商，在中國市場上與眾多的進口酶標儀器進行緊張競爭。下面分三個方面對ELISA中有關(guān)儀器及其在中國的應用作一簡要介紹。

    分離式酶聯(lián)免疫儀器

    分離式酶聯(lián)免疫儀器主要有酶標儀、洗板機。在血清離心之后，經(jīng)過加樣、洗板、孵育等過程，zui后通過吸光度判定結(jié)果。ELISA實驗在國內(nèi)主要用于定性檢驗，故目前的分離式儀器基本上可以滿足。

    酶標儀本質(zhì)上是一臺于微孔板的、可見光范圍的光電比色計。在ELISA實驗中，酶標儀是測定各微孔中試樣的吸光度的關(guān)鍵儀器，對試驗結(jié)果的判定有直接影響，是實驗室*的重要儀器之一。隨著ELISA技術(shù)的普及，酶標儀得到了很大發(fā)展，產(chǎn)品種類齊全，型號多樣，各有特色。目前國內(nèi)市場上銷售的酶標儀已*擺脫原來的單孔測量方式，整板測量、定性定量計算、存儲、多種報告格式、濾光片自動轉(zhuǎn)換等已成為基本的、*的功能，各種新推出的酶標儀性能日益完善，功能不斷擴充。具體有：

1. 測量高速化  從目前不斷推出的酶標儀趨勢來看，整板測量速度均在10s以內(nèi)，這有利于防止測量過程中各微孔吸光度的微小變化，盡可能克服環(huán)境對結(jié)果的影響，同時可以滿足動力測量的要求，測量速度在20s以上的儀器將處于不利于地位。我國現(xiàn)生產(chǎn)的酶標儀，測量整板速度一般為25s,產(chǎn)品更新周期較長。
2. 寬吸光度范圍   盡管酶標儀A=0-2.5的吸光度范圍*可以滿足實驗的要求，但國外新推出的儀器都擴寬了早期型號的吸光度范圍，較的酶標儀其線性范圍可以達到A=4.0，并且保持很好的精密度，如BIORAD公司的Benchmark,在400-750nm、A=0-4.0時其重復性與線性均不大于3.5%。又如LABYSTEMS公司的Multi-skan Ascent,其吸光度讀數(shù)范圍達A=0-4.0，在A=3.0-4.0范圍，其線性不超過2%, RSD小于1.0%。
3. 擴展到紫外  增加紫外濾光片幾乎是廠商的共同選擇。由于各種酶標儀都配有放置濾光片的可自動轉(zhuǎn)換的機構(gòu)，可以同時安裝6-8片濾光片，擴展紫外功能相對容易，一般都增加340nm濾光片。
4. 具有孵育功能  可以自動、控制反應溫度，使微孔板的孵育過程在儀器內(nèi)部完成，降低外界干擾，簡化操作步驟。如BIORAD公司的Benchmark,芬蘭LABSYSTEMS公司的Multiskan  Ascent,BIOTCK公司的EIX808等。
5. 具有動力學檢測功能   常規(guī)ELISA是一種終點法 測量實驗，測量前需要加入終止液來抑制酶免反應的進行，通過吸光度的大小來計算待測物質(zhì)的濃度，動力學方法是通過測定反應過程中吸光度的變化速率來計算相應的待測物質(zhì)的含量的，酶標儀的測量速度加快后，只要增加相應的軟件，就可以使用酶標儀完成某些生化指標的動力學測量。

洗板機是ELISA試驗保證洗滌效果、進而保證實驗質(zhì)量的重要儀器，洗板機的作用已不再是簡單的代替人的手工勞動的自動化裝置。目前國內(nèi)的洗板機除提供常規(guī)的設(shè)備清洗次數(shù)、清洗條數(shù)、浸泡時間等基本功能之外，還根據(jù)用戶的需要分別增加了底部沖洗、兩點吸液、板式/條式洗板、震蕩、位置調(diào)節(jié)及自動清洗管路、自動換液存儲多種洗板程序等功能，清洗殘留量由原來的5-6UL/孔減小到2UL/孔，有的洗板機允許用戶對洗板過程的每一步的流量、時間、位置等進行詳盡的設(shè)定。生產(chǎn)廠商根據(jù)各自對洗板技術(shù)的研究，努力提高儀器可靠性與自動化程度，同時為用戶提供一個*的、完善的洗滌環(huán)境。國內(nèi)洗板機就洗板效果、產(chǎn)品可靠性等主要指標已達到進口以前的水平，與進口儀器相比，其價格、售后服務(wù)占一定優(yōu)勢，主要差距是無定量加液。

組合式的酶聯(lián)免疫儀器

 組合式的酶聯(lián)免疫儀器分三類：全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)、自動樣品處理系統(tǒng)、流水線作業(yè)式組合系統(tǒng)。前兩者主要用于各大血站、醫(yī)院，后者主要用于試劑生產(chǎn)廠商。

全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)是將ELISA試驗中的各個步驟，從加樣、孵育、洗滌、震蕩、閉塞到定性或定量分析、報告存儲與打印功能全部集成在一臺儀器中，由儀器按用戶事先設(shè)計的程序自動進行。HAMILTON公司的FAME（世界上*臺自動板式ELISA系統(tǒng)）、BIORAD公司的CAA、奧斯邦公司的AMP、TECAN公司的Minilyser、ORGANO公司的TEKTIME、意大利S.P.A. DIVISION  STRUMENTI的PersonaiLAB等全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)已先后進入國內(nèi)市場。近兩年新進入中國市場還有DYNDRX、公司的DSX、 阿克蘇公司的Flextk2、BIOASIA代理的TRITURUS等。全自動酶聯(lián)免疫系統(tǒng)的出現(xiàn)滿足了各大醫(yī)院、血站大批量重復檢驗的要求，提高了這些單位的檢查檢驗效率與實驗水平，有效控制了大批量檢驗中極有可能出現(xiàn)的人工操作失誤，有利于ELISA實驗的質(zhì)量保證與提高，其國內(nèi)市場穩(wěn)步增長。

自動樣品處理系統(tǒng)主要用于完成ELISA實驗中的繁瑣無味、人工容易出錯的加樣、稀釋滴定、孵育、洗滌等步驟，完成之后再由酶標儀判定結(jié)果。使用自動樣品處理系統(tǒng)利用原有的酶標儀，既節(jié)約資金，又實現(xiàn)了實驗過程的自動化，是一種很經(jīng)濟的方案。