您好,歡迎來到上海研謹生物科技有限公司!
13585717991
021-65232515
ELISAS實驗血清的制備
(2)抗血清的制備
① 所需的抗原量 一般1-10mg/mL。
②免疫途徑 抗原的注射方法有皮下注射、肌肉注射、腹膜內(nèi)注射、靜脈注射和淋巴結(jié)注射等。其中以靜脈注射zui為簡單方便,不需要佐劑乳化,產(chǎn)生抗體的高峰值出現(xiàn)較早,一般在一周左右,注射后一周即可采血測試效價。免疫過程中應(yīng)注意:a.佐劑只能現(xiàn)配現(xiàn)用:b.采血時間不宜拖得太長。因為免疫時間越長,產(chǎn)生交叉反應(yīng)的抗體也越多。
③抗血清的分離 當?shù)玫綕M意的效價時,即可進行取血。將收集到的血液成斜面放置在37℃、溫箱中2h。然后置于4℃冰箱過一夜。次日用滴管吸取抗血清,用離心法(2000-3000r/min,20min)去掉沉淀。然后測定效價、鑒定純度。純度用紫外分光光度計或Folin氏比色法進行測定??寡灞4嬗?span lang="EN-US">-25℃低溫處。
④抗血清的效價測定 測定的方法一般有兩種,即試管沉淀法和免疫雙擴散法。對于免疫酶技術(shù)使用的抗血清,必須具有一定的效價,試管沉淀法應(yīng)不低于1:2,免疫雙擴散法不低于1:2,且要求單價抗血清。
(3)捕食者的收集和準備 主要方法有3個:①將胃內(nèi)含物擠在質(zhì)量好的濾紙上,但蛋白質(zhì)易與纖維素結(jié)合,若保存過久則難以洗脫:②將待檢查的捕食封閉在明膠膠囊內(nèi),并加干燥劑,以使蟲體與膠囊分離:③盡可能快地將采集到的捕食者儲存于低溫下(如-40℃)。前兩種方法適于郵寄和長途運輸,后一種方法能保存較長的時間。所有的方法都需保持干燥。對較大的捕食者,可將消化道分離,像蟻、蝸牛以及蜘蛛等小型動物則整個蟲體。(4)酶聯(lián)抗體的制備 按戊二醛簡易法進行。
上海研謹生物公司生產(chǎn)、銷售的ELISA價格適中;售后服務(wù)周到;可提供。ELISA試劑盒可以享受免費代測服務(wù)。1—2周可以出代測結(jié)果,有特殊情況的可以提前的客服!
下一篇:ELISAS實驗抗原的攝取