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ELISA與磺胺類(lèi)
李喜旺等制備了6種模擬磺胺類(lèi)藥物母核結(jié)構(gòu)的人工抗原和3種多克隆抗體,并對(duì)抗體的選擇性與親和性,免疫原與靶物質(zhì)的免疫相關(guān)性和免疫反應(yīng)條件進(jìn)行了探討。部分抗體對(duì)參試的9種磺胺類(lèi)藥物顯示了高度的選擇性和親和性,其中7種藥物Ci-ELISA抑制曲線,檢測(cè)限低于0.01 ug/mL,并在PH=4.4~5.4的介質(zhì)中親和性zui強(qiáng)。Sheth等制備了多種模擬磺胺類(lèi)藥物母核結(jié)構(gòu)的人工抗原和多克隆抗體,并以建立了檢測(cè)磺胺類(lèi)藥物的Ci-ELISA方法。吳定等以BSA為載體合成兩種不同摩爾比值(1:13和1:42)磺胺甲基嘧啶人工抗原并比較其免疫原性。免疫家兔后獲得抗磺胺甲基嘧啶(SMD)多克隆抗體,并以之建立了乳中磺胺甲基嘧啶殘留的Ci-ELISA方法,標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作濃度為5~20ng/Ml,檢測(cè)限為2.4ng/ML回收率88%~118%??寡迮c磺胺二甲基嘧啶和磺胺噻唑交叉反應(yīng)率分別為6.0%和0.84%,而與其他磺胺類(lèi)藥物無(wú)交叉反應(yīng)。研究結(jié)果還表明半抗原與載體蛋白的結(jié)合比在1:10~1:25為宜。劉智宏等用戊二醛法合成了SQ-BSA人工抗原并用其免疫家兔制備了SQ多克隆抗體,并以之建立了Ci-ELISA方法,標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系良好,檢測(cè)限為100uL/L,回收率為93.7%,批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差6.4%。抗血清對(duì)SQ有很高的選擇性,在12種磺胺類(lèi)和非磺胺類(lèi)藥物中,zui大交叉反應(yīng)率僅為0.1%。
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